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浊度计(分光光度计和紫外分光光度计的区别)

安心医药2023-11-10医疗保健108
一、分光计和分光光度计是同一玩意儿么分光计,是一种测量角度的精密仪器。其基本原理是,让光线通过狭缝和聚焦透镜形成一束平行光线,经过光学元件的反射或折射后进入望远镜物镜并成像在望远镜的焦平面上,通过目镜

一、分光计和分光光度计是同一玩意儿么

分光计,是一种测量角度的精密仪器。其基本原理是,让光线通过狭缝和聚焦透镜形成一束平行光线,经过光学元件的反射或折射后进入望远镜物镜并成像在望远镜的焦平面上,通过目镜进行观察和测量各种光线的偏转角度,从而得到光学参量例如折射率、波长、色散率、衍射角等。

而分光光度计,则是测量液体某物质浓度的仪器。光波穿过某液体,会被液体吸收一定的光波。而同种溶液,吸收光波的量与液体的浓度有关系。所以某未知浓度的液体,要测量它的浓度,通常是手工配制不同浓度的该液体(我们把它叫标准溶液,或者叫标准),然后用分光光度计测量不同浓度的标准溶液对某一波长的光的吸收情况。光波长选用固定波长。因此随着浓度的增大或者减小,标准溶液的光的吸收情况也随之增大或者减小。此时我们可以制作这样一根坐标线,反应不同浓度的溶液对光的吸收程度。然后将待测液体放在分光光度计里面,测量待测溶液对光的吸收情况,根据测量出来的吸收情况,可以在上述标准溶液吸收情况坐标系里找出对应的待测溶液的浓度了。。。。

根据这个方法,在不同波长下对应不同种类的溶液,根据它对光的吸收情况,也可以确定溶液的种类。

二、分光光度计和紫外分光光度计的区别

首先在测定波长范围有所不同:紫外一般用氢灯,测定波长范围180~350nm,可见一般用钨灯,测定波长范围320~1000nm。所谓紫外可见分光光度计也就是说这个仪器可以更换光源,能够测定吸收峰在紫外和可见光部分的化合物。

发现吸光度超过2,便不再显示,是正常现象。

吸光度是透光率的负对数,吸光度超过2就是说透光率小于1%,低于仪器的检出限,就不再显示了。

至于能不能用分光光度计,取决于你测定的波长。

具体来说分为以下三点:

1、光学器件的不同:由于玻璃能吸收紫外波,而对可见到近红外端有比较好的透过性,所以可见分光光度计的一些光学部件可以使用玻璃,而紫外可见分光光度计就不能使用玻璃部件,一般使用石英光学部件。同时由于这个原因,在比色皿的选择上也就有不同了,可见分光光度计可以使用玻璃制的比色皿,而紫外可见分光光度计一般使用石英制的比色皿了。

2、光源不同:可见分光光度计的光源一般只用钨灯,而紫外可见分光光度计是用钨灯+氘灯两个光源,同时还多了这两个光源灯的切换部件。这是因为钨灯的光谱范围主要在可见到近红外这段,氘灯主要在紫外端。也正是因为光源的不一样,紫外可见分光光度计也多了一个专门提供氘灯工作的氘灯电源了。

3、接收器的不同:由于紫外可见分光光度计多了紫外波,所以在接收器的选择上也就不一样了。多了对紫外波的灵敏响应功能,这类接收器的价格就比可见分光光度计的接收器贵了很多了。

三、分光光度计是怎么使用的

分光光度计使用方法:

(1)仪器预热。打开样品室盖(光门自动关闭)。开启电源,指示灯亮,仪器预热20 min。选择开关置于“T”旋钮,使数字显示为“00.0”。

(2)旋动波长手轮,把所需波长对准刻度线。

(3)将装有溶液的比色皿放置比色架中,令参比溶液置于光路。

(4)盖上样品室盖,调节透光率“100%T”旋钮,使数字显示为“100.0T”。(如显示不到100%T,则可加按一次。

(5)吸光度A的测量:仪器调T为0和100%后,将选择开关转换至A调零旋钮,数字显示应为“.000”。然后拉出拉杆,使被测溶液置入光路,数字显示值即为试样的吸光度A。

(6)测定完毕后,先打开样品室盖,再断电源。比色杯应清洗干净后,再贮放保存。

(7)浓度直读按MODE键,使CONC批示灯亮,交已标定浓度的溶液移入光路,按下溶液调节键(↑100%T键的↓0%键),使数字显示为标定值,将被测溶液移入光路,即读出相应浓度值。

(8)仪器数字显示背后,装有接线柱,按下FUNC键,可输出模拟信号

四、分光光度计的工作原理

浊度计(分光光度计和紫外分光光度计的区别)

分光光度计的基本工作原理是基于物质对光(对光的波长)的吸收具有选择性,不同的物质都有各自的吸收光带。

所以,当光色散后的光谱通过某一溶液时,其中某些波长的光线就会被溶液吸收。在一定的波长下,溶液中物质的浓度与光能量减弱的程度有一定的比例关系,即符合比尔定律。

T= I/Io lg(Io/I)=εcb

式中,T为透过率,Io为入射光强度,I为透射光强度,A为消光值(吸光度),ε为吸收系数,b为溶液的光径长度,c为溶液的浓度。从以上公式可以看出,当入射光、吸收系数和溶液厚度一定时,透光率是根据溶液的浓度而变化的。

分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。

注意事项:

1、该仪器应放在干燥的房间内,使用时放置在坚固平稳的工作台上,室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风,防止灯泡灯丝发亮不稳定。

2、使用本仪器前,使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理,以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前,应该对仪器的安全性能进行检查,电源接线应牢固,通电也要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再按通电源开关。

3、在仪器尚未接通电源时,电表指针必须于“0”刻线上,若不是这种情况,则可以用电表上的校正螺丝进行调节。