暗视显微镜又名叫什么(暗视野显微镜)
一、暗视野和相差显微镜下洋葱内表皮细胞的差别
暗视野和相差显微镜下洋葱内表皮细胞的差别:暗视野显微镜看到的图像背景是暗的(实验时只看到了细胞形状,没看到细胞核。。。),细胞细胞壁是亮的,明暗反差明显。细胞壁内都是暗的,观察到的细胞是不透明的。相差显微镜看到的跟光学显微镜下差不多,因为将相位差转变成了振幅差未染色的洋葱表皮更加清晰,明亮,可清晰地看到细胞核。荧光显微镜观察洋葱内表皮细胞由于没有叶绿素,一般要经过染色观察,能观察到清晰地细胞核发出的继发荧光!
二、相差显微镜和暗视野显微镜的不同
暗视野实际是暗场照明发。它的特点和明视野不同,不直接观察到照明的光线,而观察到的是被检物体反射或衍射的光线。因此,视场成为黑暗的背景,而被检物体则呈现明亮的象。
暗视野的原理是根据光学上的丁道尔现象,微尘在强光直射通过的情况下,人眼不能观察,这是因为强光绕射造成的。若把光线斜射它,由于光的反射,微粒似乎增大了体积,为人眼可见。
m..m暗视野观察所需要的特殊附件是暗视野聚光镜。它的特点是不让光束由下至上的通过被检物体,而是将光线改变途径,使其斜射向被检物体,使照明光线不直接进入物镜,利用被检物体表面反射或衍射光形成的明亮图象。暗视野观察的分辨率远高于明视野观察,最高达0.02—0.004
相差镜检法(Phase contrast PH)
在光学显微镜的发展过程中,相差镜检术的发明成功,是近代显微镜技术中的重要成就。我们知道,人眼只能区分光波的波长(颜色)和振幅(亮度),对于无色通明的生物标本,当光线通过时,波长和振幅变化不大,在明场观察时很难观察到标本.
相差显微镜利用被检物体的光程之差进行镜检,也就是有效地利用光的干涉现象,将人眼不可分辨的相位差变为可分辨的振幅差,即使是无色透明的物质也可成为清晰可见。这大大便利了活体细胞的观察,因此相差镜检法广泛应用于倒置显微镜。
三、什么是暗视野显微镜
暗视野显微镜(dark field microscope)的聚光镜中央有当光片,使照明光线不直接进人物镜,只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜,因而视野的背景是黑的,物体的边缘是亮的.利用这种显微镜能见到小至 200nm的微粒子,分辨率可比普通显微镜高50倍.
1、原理:暗视野聚光器,使光源的中央光束被阻挡.不能由下而上地通过标本进入物镜.从而使光改变途径,倾斜地照射在观察的标本上,标本遇光发生反射或散射,散射的光线投入物镜内,因而整个视野是黑暗的.
2、适用范围:暗视野显微镜常用来观察未染色的透明样品.这些样品因为具有和周围环境相似的折射率,不易在一般明视野之下看的清楚,于是利用暗视野提高样品本身与背景之间的对比.这种显微镜能见到小至4~2004~200nmnm的微粒子,只能看到物体的存在和运动,不能辨清物体的细微结构.
3、使用方法
(1)把暗视野聚光器装在显微镜的聚光器支架上.
(2)选用强的光源,但又要防止直射光线进入物镜,所以一般用显微镜灯照明.
(3)在聚光器和标本片之间要加一滴香柏油,目的是不使照明光线于聚光镜上面进行全反射,达不到被检物体,而得不到暗视野照明.
(4)升降集光器,将集光镜的焦点对准被检物体,即以圆锥光束的顶点照射被检物.如果聚光器能水平移动并附有中心调节装置,则应首先进行中心调节,使聚光器的光轴与显微镜的光轴严格位于一直线上.
(5)选用与聚光器相应的物镜,调节焦距,找到所需观察的物像.
四、什么叫暗视野显微镜检查
?这种检查是临床上较为先进的检查方式,一般的显微镜,人工或自然光源通过集光器反射到载物台和目镜内,即可看到载物台上物体和组织。梅毒螺旋体是不易着色的微生物.折光性强.在普通的显微镜下就无法看清它。当我们处在一问黑暗的房间内,可以看到漏进来的光柱中有尘埃在飞舞,利用这样的原理,我们在暗视野显微镜中所看到的不是直接反射的光线.而是照射在螺旋体上折射光,在黑色的背景下,梅毒螺旋体衬映得特别明显。做暗视野显微镜检查关键在于取材,尤其是硬下溶、扁平湿疚和二期皮肤斑丘疹含有较多的梅毒螺旋体。尽量选挥病期短、没有溃破的病损。操作者放手套,用盐水棉球擦去病损表面的渗出物和结疵,用一手压紧或挤紧取材处的病损组织,另一手用手术刀刮或划破病损组织表面。如渗出的是血液,应擦掉弃去,待渗出血清时,用干净的载玻片提取,这样才取材完毕。遇见已经溃破的硬下疳,并发有细菌感染,取这样的材在显微镜下是看不清的,可以用一注射器,吸取L5毫升等接盐水,径皮穿刺入病人的腹股沟部位肿大的淋巴结内,注入后反复抽吸数次,最后将油出的液体涂于玻片上作标本用。在暗视野显微镜下所看到的梅毒螺旋体,英特征有:①螺旋体整齐规则,固定不变;②梅毒螺旋体折光性比其它螺旋体强;②活动缓慢而有规律,即围绕其长轴旋转并前后运动,仲缩圈间之距离而运动,全身变曲如蛇形。用暗视野显微锐检查病损内的螺旋体,是一个最古老的、最简单的、最可靠的检查梅毒的实验方法。对早期诊断梅毒有十分重要的价值,其诊断牢约65%。一般来说,如找到梅毒螺旋体,结合病史即可诊断为梅毒;如找不到,则不能认为不是梅毒。就医提醒:艾拉光动力免疫综合疗法是目前经国际标准化审核并实际临床验证后被认可的国际上治疗性病最为先进最为权威的治疗技术,特别是针对尖锐湿疣和生殖器疱疹效果非常显著,成都民生皮肤病医院引进这一技术以来,已先后治愈上千例各类性病患者,治愈率高达92.8%,并基本杜绝复发可能性。