苯丙氨酸化学结构(L-苯丙氨酸的生产方法)
一、L-苯丙氨酸的生产方法
L-苯丙氨酸的制备方法很多,有蛋白质水解提取法,直接发酵法,化学合成等。化学合成法有苯甲醛法和苯乙醛法。以苯甲醛和乙酰甘氨酸作用生成乙酰氨基桂皮酸,然后催化加氢还原,得乙酰-DL-苯丙氨酸(Ac-DL-phe),最后经氨基酰化酶水解,可拆分生成L-苯丙氨酸。
利用氨基酰化酶的专一性,只水解Ac-L-phe的酰氨键,生成L-phe,而不能水解Ac-D-phe的酰胺。然后根据L-phe和Ac-D-phe在水中的溶解度不同进行分离。而分离出的Ac-D-phe又可经消旋化生成Ac-DL-phe。再一次重复水解、分离。依次类推,可将Ac-DL-phe全部转化为L-phe。
固定化氨基酰化酶的制备将DEAE-sephadexa-50放入去离子水中充分浸泡后,再依次用10倍量的0.5mol/L HCl和0.5mol/L NaOH溶液充分搅拌处理30min。然后用去离子水洗至中性,最后分别用0.1mol/L及0.01mol/L的pH=7.0的磷酸缓冲液处理1-2h,滤干,备用。取经培养40-50h的米曲扩大曲,用其6倍量的支离子水分2次提取,提取液用2mol/L的NaOH溶液调pH至6.7-7.0。然后按100L酶液和1kg湿DEAE-sephadex A-50的比例混合,于0-4℃搅拌吸附4-5h后,过滤取DEAE-sephadexA-50,并分别用去离子水0.1mol/L NaAc溶液、0.01mol/L的pH=7.0的磷酸缓冲液洗涤3-4次。过滤得固定化氨基酰化酶,加1%甲苯放入冷库中贮存备用。
酶水解在1000L水解罐中,加入700L 0.1mol/L Ac-DL-phe钠盐溶液,再逐步加入6mol/L的HCl调溶液pH至6.7-7.0,再加入15-20kg固定化氨基酰化酶,维持50℃约4h进行酶选择性水解反应后,过滤取滤液,得酶水解液(含L-phe和Ac-D-phe混合液)。
分离将酶水解液用6mol/L的HCl调pH至4.8-5.1,减压浓缩至35L左右,并将其放置于0℃结晶过夜,过滤取结晶,用10L冷乙醇洗涤,于80℃烘干3-4h,得L-phe粗品,滤液和洗涤液合并,减压浓缩至20L左右,得Ac-D-phe溶液,待外消旋化后再重复进行酶水解、分离。
Ac-D-phe的外消旋化将Ac-D-phe溶液60L,加入100L反应罐中,加入醋酐18.5L,在25-45℃,搅拌30min,冷却放置6h。再用浓HCl调pH值至1.5-2.0, 5℃结晶过夜,过滤取结晶,水洗,滤干40℃真空干燥,得Ac-DL-phe。
精制在100L反应罐中,加入5kg L-phe粗品,加50L去离子水,加热至100℃,搅拌使其全溶,再加入药用活性炭0.25kg,搅拌脱色半小时后,趁热过滤,滤液移入200L结晶罐中,冷却至40℃,加入50L, 40℃的95%乙醇,用6mol/L的HCl调pH至5.48,于0℃结晶过夜,过滤取结晶,用95%乙醇洗涤,抽干, 80℃干燥3-4h,得L-phe成品。母液再回收。适用Bucherer反应,生成苯甲基乙内酰脲,然后碱性解得DL-苯丙氨酸(DL-phe)。
将DL-phe与醋酐作用生成Ac-DL-phe后,按上述方法进行拆分,可得L-phe。合成法制备苯丙氨酸的收率低,通常从天然产物中提取。将脱脂大豆用盐酸水解后,除去酸性氨基酸,用活性炭或脱色树脂吸附苯丙氨酸和酪氨酸。然后,用溶剂将苯丙氨酸溶出、分离。也可采用先把水解液中的苯丙氨酸转变为2,5-二溴苯磺酸盐,然后利用溶解度的差异,从亮氨酸、精氨酸等氨基酸中分离出来的方法。
二、DL-苯丙氨酸和L-苯丙氨酸有什么区别
如果是化学合成方法制备的苯丙氨酸,因为没有手性,所以是D型和L型混合的。而生物体内的苯丙氨酸都是L型的,所以从生物来源制备的苯丙氨酸是L型的。
原因是因为酶,酶是有手性的,所以其产物也有手性
三、L-苯丙氨酸的用途
营养增补剂。必需氨基酸之一。在大多数食品的蛋白质中几乎非限制氨基酸。可添加于焙烤食品,除强化苯丙氨酸外,与糖类起氨基-羰基反应,可改善食品的香味。
功用:L-苯丙氨酸是重要的食品添加剂-甜味剂阿斯巴甜(Aspartame)的主原料,人体必需氨基酸之一,在医药行业主要用于氨基酸输液和氨基酸类药物。L-苯丙氨酸是人体不能合成的一种必需氨基酸。食品工业上主要用作食品甜味剂阿斯巴甜的合成原料;也可作为营养增补剂。
生化研究。配制培养基。营养学研究。
L-苯丙氨酸是必需的氨基酸之一。用作营养强化剂、氨基酸输液和复合氨基酸制剂的成分。该品是多种抗癌药物及二肽甜味的原料。
氨基酸类药。用于氨基酸输液、综合氨基酸制剂及营养强化剂,大量用于合成新型甜味剂天冬甜素(L-天冬氨酸、L-苯丙氨酸结合的二肽甲酯)
是合成阿斯巴甜的主要原料。
四、l-丙氨酸在农业的应用
L-苯丙氨酸(英文名:L-Phenylalanine)为无色至白色片状晶体或白色结晶性粉末,是一种养分增补剂,是必需氨基酸之一。在体内大局部经苯丙氨酸羟化酶催化作用氧化成酪氨酸,并与酪氨酸一同分解重要的神经递质和激素,参与机体糖代谢和脂肪代谢。
无色至白色片状晶体或白色结晶性粉末。略有特殊气息和苦味。在受热、光照、空气中波动。